肌钙蛋白I和肌钙蛋白T有何区别
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发布时间:2022-04-22 11:22
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时间:2023-09-17 22:43
血清TnI和TnT指的肌钙蛋白T(TnT)、肌钙蛋白I(TnI),是组成肌钙蛋白的两个亚基。
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概述
肌钙蛋白是肌肉收缩的调节蛋白,由三个结构不同的亚基组成,即肌钙蛋白T(TnT)、肌钙蛋白I(TnI)和肌钙蛋白C(TnC),它附在收缩的横纹肌细微组织上,TnI是一种结构蛋白,它与肌动蛋白及原肌球蛋白互相作用。TnI与肌动球蛋白在静止状态时相结合,抑制肌动球蛋白的ATP酶(ATPase)活性。TnC有四个能结合钙离子的结合点,当它与细胞内的钙离子结合时,能导致整个肌钙蛋白构造上的变化。肌钙蛋白放松了肌动球蛋白,让肌动球蛋白与肌浆球蛋白互起作用,而造成肌肉收缩。肌钙蛋白具有的3种同分异构体,其中两种同分异构体是骨骼肌所特有的,一种同分异构体是心肌所特有的,这3种肌钙蛋白的同分异构体存在着结构上的差异。心肌中的T和I亚基结构不同于其他肌肉组织,心肌钙蛋白T、I(CTnT、CTnI)由于分子量小,分别为37000D和24000D,所以发病后血中浓度迅速升高,目前已得到抗CTnT和CTnI的特异抗血清,套用免疫层析与酶免技术可进行快速检测与定量测定,具有快速、灵敏、特异等特点。
别名
TnI;TnT
医学检查
检查名称
血清TnI和TnT
分类
血液生化检查 > 蛋白质测定
化验取材
血液
原理
(1)心肌钙蛋白T、I的快速检测:套用免疫层析方法测定样品中的特异抗原(CTnT、CTnI)。测试时滴加血清样品于样品槽,样品通过毛细管效应沿试纸膜运动,如果样品中含有特异抗原,试验部位就出现色带,在对照区域内应该有另一颜色条带作为实验对照。 (2)心肌钙蛋白T的ELISA法测定:生物素与亲和素作用下的双抗体夹心ELISA,用链霉亲和素-生物素化的抗TnT单克隆抗体作包被物,依次于样品中TnT抗原和酶标TnT单克隆的抗体反应,然后加入底物色原。酶催化底物显色,由系列TnT标准制定的标准曲线,定量测定CTnT含量。
试剂
(1)心肌钙蛋白T、I的快速检测:CTnT免疫层析试纸条(德国宝灵曼公司专利)。 CTnI免疫层析试纸条(进口)。 (2)心肌钙蛋白T的ELISA法测定: ①生物素-亲和素CTnT单克隆抗体包被板。 ②孵育缓冲液。 ③浓缩洗涤液。 ④酶标结合物。 ⑤CTnT标准品。 ⑥底物色原:ABTS(二氨2,2叠氮)。
操作方法
(1)心肌钙蛋白T、I的快速检测: ①将包装纸打开,标记上样品编号。 ②加5~6滴血清样品到样品槽中。 ③在10~15min内观察色带出现情况。 附注: ①试纸条只能用1次,重复使用无效。 ②试纸条试验区和对照区均不出现色带,取另一试纸条重复检测仍无结果,则表示试纸条失效。 ③免疫层析技术测定CTnT、CTnI适合床边快速试验,但只是定性或半定量,要真正了解病情严重程度及选择治疗措施还需定量测定。 (2)心肌钙蛋白T的ELISA法测定: ①在包被板中分别加入标准血清,对照血清和病人标本于相应的孔内各50μl。 ②每孔各加孵育缓冲液50μl,并轻轻混匀。 ③室温下孵育60min后洗涤三次,10min内完成。在吸水纸上用力拍打微孔。以除去残留水滴。 ④每孔各加入酶结合物100μl,轻轻混匀。 ⑤倒空微孔板中的孵育液,用洗涤液将微孔洗三次,在吸水纸上用力拍打微孔,以除去残留水滴。 ⑥将200μl色原底物溶液加入相应的孔中,避光,轻轻混匀,静置30min。 ⑦用酶标仪在10min内,于405nm和630nm双波长下测定吸光度值(OD值)。 附注: ①CTnT待测标本最好用血清,不要用抗凝血浆,因为抗凝剂如:肝素、EDTA等对CTnT有影响。 ②由于CTnT是心肌细胞损伤释放出来的,所以尽量避免标本溶血,如果标本溶血很可能造成检测结果增高。 ③配制好孵育液不要冷冻保存,应放在2~8℃冷藏。 ④实验前应注意试剂有无失效,如变质,其颜色加深。 ⑤为了提高CTnT检测的可靠性,应注意加样的准确及其他操作过程,比色最好选用双波长。
正常值
干片法:TnI阴性 免疫法:TnT0~0.15μg/L 。
化验结果意义
升高:心肌缺血损伤,如心肌梗死、急性心绞痛、不稳定型心绞痛、心脏手术后等。心肌损伤后、血中出现TnI、TnT时间最早、持续时间长,因此TnI、TnT是心肌损伤的一个较特异和较灵敏的指标,TnI较TnT更敏感。 (1)急性心肌梗死(AMI),发病后血中浓度很快增高,GTnT、CTnI,3~6h超过参考值上限值,GTnT 10~24h达峰值,10~15天恢复正常。CTnI 14~20h达峰值,5~7天恢复正常。即出现早,和CK-MB相当或稍早;消失慢,持续时间超过LD1,诊断的视窗期特别长,兼有CK-MB和LD1的优点。灵敏度GTnT为50%~59%(0~6h),CTnI为6%~44%;特异性GTnT为74%~96%,CTnI为93%~99%。据报导GTnT在诊断AMI时比CK-MB更为灵敏,但有报导在肾脏疾病病人血样中发现GTnT,所以特异性较差。GTnT比LD1/LD2比率在诊断AMI中更为灵敏,且在肾病及其他疾病患者血液中未发现CTnI,所以CTnI是心脏受损时唯一的特异性标志物。由于GTnT和CTnI消失慢,所以,可作为心肌梗死后期标志物。 (2)GTnT和CTnI可作为心脏手术中心肌梗死症状出现的指示物,当病人接受动脉搭桥手术时,若GTnT和CTnI含量增加,表明出现心肌梗死,而此时CK-MB含量并无变化。
相关疾病
急性心肌梗死